Čistící zařízení pro čištění Oligo

1. Čištění gelovou elektroforézou chromatografií
K čištění použijte denaturační elektroforézovou chromatografii na polyakrylamidovém gelu.Denaturačním činidlem je obecně 4M formamid nebo 7M močovina, koncentrace akrylamidu se pohybuje mezi 5–15 % a podíl methakrylamidu je převážně mezi 2–10 %.
Po elektroforéze je potřeba určit polohu pásu nukleové kyseliny za ozáření ultrafialovým světlem, gel obsahující cílovou nukleovou kyselinu se odřízne, nukleová kyselina se rozdrtí a vyluhuje a poté se vyluhovací roztok zahustí, odsolí, kvantifikovány a lyofilizovány.

2. DMT-On, čištění HPLC
Během syntézy zvolte režim DMT-On, surový produkt byl odstředěn a zahuštěn při teplotě místnosti, aby se odstranil přebytek amoniaku po aminolýze.
Separace byla provedena za použití C18 kolony s acetonitrilem a 10% triethylamin-kyselinou octovou (TEAA) jako eluentem.Po dokončení eluce se koncentruje a potom se DMT skupina odstraní kyselinou trifluoroctovou.Po neutralizaci jsou některé soli a malé molekuly odstraněny přes odříznutou trubici a nakonec odsoleny.

Touto metodou lze získat produkt s vyšší čistotou, je však nutné dávat pozor na výskyt depurinace.

3. DMT-Off, čištění HPLC
Během syntézy zvolte DMT-Off a surový produkt se odstředil a zakoncentroval při teplotě místnosti, aby se odstranil přebytek amoniaku po amonolýze.
Separace byla provedena za použití C18 kolony s acetonitrilem a 10% triethylamin-kyselinou octovou ve vodě jako eluentem.Po dokončení separace a kvantifikaci se alikvoty lyofilizují.

Tato metoda vyžaduje pečlivou úpravu separačních podmínek a může také získat relativně čisté cílové molekuly.